Calcein Tetraethyl Ester（简称 Calcein AM）是一种无色、非极性的细胞膜穿透型荧光探针，广泛用于活细胞活力检测、细胞功能分析和细胞成像等领域。它是 Calcein 的一种酯化衍生物，通过增加脂溶性乙基酯基团，显著提高了分子穿透细胞膜的能力。

分子结构与性质

Calcein 本身为极性分子，不易穿透细胞膜。Calcein Tetraethyl Ester 通过将 Calcein 分子上的羧基转化为四个乙基酯，使其疏水性增强，能够自由穿透细胞膜进入细胞内。

进入细胞后，细胞内的非特异性酯酶会迅速水解乙基酯基团，释放出高度极性的 Calcein。Calcein 在细胞内积累并结合钙离子后，表现出明亮的绿色荧光信号。

光谱特性

• 激发波长（λ_ex）：约 495 nm
• 发射波长（λ_em）：约 515 nm
• 荧光颜色：明亮绿色
• 高荧光量子产率，适合高灵敏度检测

这种光谱性质使 Calcein Tetraethyl Ester 可被常见的激发光源（如蓝光激光器或 LED）激发，适配多种荧光显微镜和流式细胞仪。

主要应用

1. 细胞活力和存活率检测

Calcein Tetraethyl Ester 常用于细胞活力检测。仅活细胞内酯酶活性正常，能将 Calcein AM 水解成荧光活性 Calcein，因此染色后活细胞显示绿色荧光，而死细胞不发光。该方法简单、灵敏且无损伤性，适合大量细胞的活力评估。

2. 细胞内钙离子检测

Calcein 能与细胞内钙离子结合，形成稳定的复合物，荧光强度与钙离子浓度相关，部分应用用于钙离子信号监测和钙稳态研究。

3. 荧光成像与细胞跟踪

由于 Calcein 的高亮度和细胞内稳定性，Calcein Tetraethyl Ester 可用于活细胞成像和长时间跟踪细胞迁移、分布情况。

4. 多细胞系统功能评估

Calcein Tetraethyl Ester 被广泛应用于共培养系统、细胞毒性评估、药物筛选以及细胞迁移、增殖等功能性实验。

使用方法与注意事项

• Calcein Tetraethyl Ester 通常以无水的 DMSO 溶解，制备一定浓度的储备液，储存于 –20℃避光保存。
• 使用时将储备液稀释至适当浓度（通常 1–5 µM）于细胞培养液中孵育，孵育时间一般为 15–60 分钟，具体根据细胞类型调整。
• 染色后需用 PBS 或无酯酶的缓冲液洗涤细胞，去除游离染料。
• 染色过程避免强光照射，减少光漂白影响。
• 由于依赖细胞内酯酶活性，死细胞或酯酶活性降低的细胞无法产生荧光，确保染色结果准确。

优势总结

• 细胞膜透过性强，能有效进入各种类型的活细胞。
• 水解后形成高亮度绿色荧光，灵敏度高。
• 非侵入性检测，对细胞无明显毒性，适合活细胞实验。
• 广泛适用于多种细胞类型及实验模型。

总结

Calcein Tetraethyl Ester 是一种经典的活细胞荧光探针，因其良好的细胞膜穿透能力和酯酶依赖的荧光释放机制，成为细胞活力检测、钙离子监测及细胞成像领域的重要工具。它操作简便，信号清晰稳定，广泛应用于细胞生物学、药理学、毒理学和医学研究，为活细胞功能和状态的评估提供了强有力的技术支持。

英文名称： Calcein tetraethyl ester

中文名称： N,N'-[(3',6'-二羟基-3-氧代螺[异苯并呋喃-1(3H),9'-[9H]氧杂蒽]-4',5'-二基)二(亚甲基)]二[N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)甘氨酸] 1,1'-二乙酯

MF： C38H42N2O13

MW： 734.75

CAS： 1170856-93-5

结构式：

1170856-93-5，Calcein Tetraethyl Ester

包装： 瓶装

供应： 西安齐岳生物

适用范围：仅限科研实验使用

规格选择： 多种规格，包含50 mg、100 mg、250 mg、500 mg等

物理形态： 可根据需求提供固体、粉末或溶液形式

储存条件： 建议冷藏保存，以维持产品的稳定性和活性

推荐试剂： CF 488A CTB，CF 488A Cholera Toxin Subunit B AF 680 Tomato lectin，AF 680 LEL CF 405M LEL，CF 405M Tomato lectin Biotin LEL，生物素 LEL Alexa Fluor 647 CTB CF 640R CTB AF 660 Tomato lectin CF 488A Tomato lectin Rhodamine LEL，RB LEL AF 594 CTB CF 640R Tomato lectin Fluorescein LEL，FITC LEL CF 680 CTB

备注： 信息整理 / 编辑：kx