反应机理:
5-Ethynyl uridine(5-乙炔基尿苷)是一种核苷类似物,常用于生物化学和细胞生物学研究中,尤其是在研究RNA合成、细胞增殖和基因表达调控等方面。
结构:5-EU 是尿苷(Uridine)的衍生物,其5位上的羟基被乙炔基(-C≡CH)取代。
结构式:
基础知识概述:
CAS:69075-42-9
中文名:5-乙炔基尿苷
英文名:5-Ethynyl uridine
分子式:C11H12N2O6
分子量:268.22
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
相关应用:
1.RNA合成的检测:
5-EU 可以被细胞摄取,并掺入到新合成的RNA中。通过检测5-EU的掺入,可以评估细胞的RNA合成活性。
常用于研究基因表达的调控机制,例如转录活性、RNA加工和稳定性等。
2.细胞增殖的标记:
由于RNA合成与细胞增殖密切相关,5-EU 可以作为细胞增殖的标记物。通过检测5-EU的掺入,可以区分增殖细胞和非增殖细胞。
常用于细胞生物学研究,例如干细胞研究、肿瘤细胞增殖分析等。
3.荧光成像:
5-EU 本身不具有荧光,但可以通过点击化学(Click Chemistry)反应与荧光染料(如Alexa Fluor系列)结合,从而实现荧光成像。
例如,5-EU 可以与叠氮基团(Azide)标记的荧光染料发生CuAAC(铜催化的叠氮-炔基环加成)反应,生成稳定的三唑环产物,从而实现细胞内RNA的荧光标记和成像。
使用方法:
1.细胞标记:
将5-EU 添加到细胞培养基中,通常浓度范围为100-500 µM,孵育时间根据实验需求而定(通常为数小时到数天)。
细胞摄取5-EU 后,5-EU 会被掺入到新合成的RNA中。
2.点击化学反应:
使用CuAAC反应将5-EU 与荧光染料结合。反应条件通常包括:
5-EU标记的RNA
叠氮基团标记的荧光染料(如Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 594等)
铜催化剂(如CuSO₄)
还原剂(如抗坏血酸钠)
反应完成后,通过荧光显微镜观察细胞内RNA的分布。
注意事项:
纯度标准95%+
保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C
注意事项:仅用于科学研究
相关试剂(部分):
Uridine diphosphate glucose
Uridine triacetate
Uridine triphosphate
Tri-O-acetyl uridine
Uridine-5'-diphosphoglucose pyrophosphorylase
Uridine triphosphate trisodium dihydrate
Uridine-5'-diphosphate disodium salt
Uridine-5-oxyacetic acid
Uridine-5-oxo-acetyl-(9-fluorenylmethyl) ester
N3-(Butyn-3-yl)uridine
Uridine adenosine tetraphosphate
5-(t-Butyloxycarbonylmethoxy)uridine
Uridine 5-oxyacetic acid methyl ester
Uridine 5'-O-thiodiphosphate
Uridine diphosphate glucuronic acid
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