Fluo-5N,Acetoxymethyl Ester,操作流程
创始人
2025-04-17 00:03:53
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I.Fluo-5N AM,Cell Permeant物理参数

其他名称:Fluo-5N,Acetoxymethyl Ester

分子式:C50H47F2N3O25

分子量:1127.92

解离常数:~90µM

纯度:≥95%

储存条件:-20℃避光干燥

II.Fluo-5N AM,Cell Permeant的简单概述

Fluo-5N AM 是一种用于细胞内钙离子动态检测的细胞膜通透性荧光探针。

Fluo-5N AM 是 Fluo-4 的结构类似物,但具有较低的钙结合亲和力,解离常数约为 90 µM

这一特性使其适用于检测较高浓度的钙离子(1 µM ~ 1 mM),避免了其他较高亲和力探针(如 Fluo-3、Fluo-4)在类似浓度范围内的信号饱和问题。

作为乙酰甲酯(AM)衍生物,Fluo-5N AM 可通过被动扩散进入细胞。胞内酯酶水解其酯基后,释放带负电荷的荧光基团(Fluo-5N),从而被捕获在细胞内。

III.Fluo-5N AM,Cell Permeant操作流程

【试剂配制】

Pluronic F-127 母液:100 mg 粉末溶于 500 µl DMSO(20% 浓度),40-50℃ 加热溶解。

Fluo-5N AM 储存液:用无水 DMSO 配制成 2-5 mM 溶液,可加入 20% Pluronic F-127 增强水溶性。

【细胞加载】

工作液浓度:1-20 µM(用 HHBS 缓冲液稀释)。

孵育条件:室温或 37℃,20-120 分钟,若细胞含有机阴离子转运体,需加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM)抑制探针泄漏。

【后处理与检测】

清洗:用含转运体抑制剂的缓冲液清洗 1-2 次,去除残留探针。

去酯化:室温再孵育 30 分钟,确保 AM 基团完全水解。

检测:使用 494/516 nm 激发/发射波长采集荧光信号。

IV.Fluo-5N AM,Cell Permeant同类型试剂

DiOC18(3),34215-57-1

CDCFDA,SE活细胞示踪探针

2-NBDG葡萄糖摄取荧光探针

Rhod-4,AM,Cell Permeant

MitoPerOx线粒体脂质过氧化探针

BCECF AM,Cell Permeant pH荧光探针

Nigericin,Sodium Salt尼日利亚菌素(钠盐)

BCECF Acid, Cell Impermeant pH荧光探针

Rhod-2,AM,Cell Permeant钙离子荧光探针

Cal-590 AM,Cell Permeant 钙离子荧光探针

Mag-520 AM,Cell Permeant 镁离子荧光探针

Indo-1 Pentapotassium Salt, Cell lmpermeant

DAF-FM DA一氧化氮 (NO) 荧光探针 254109-22-3

MitoA(Mitochondrial H2S Probe)线粒体硫化氢探针

BCFL Acid (Superior replacement for BCECF Acid) pH荧光探针

BCFL Acid (Superior replacement for BCECF Acid) pH荧光探针

Indo-1 Pentapotassium Salt, Cell lmpermeant 钙离子荧光探针

2-[4-(Dimethylamino)styryl]-1-ethylpyridinium iodide(DASPEI) 线粒体荧光探针

提示:该试剂用于科研实验室,由西安强化生物科技xxn所编辑整理,不得用作食品、人体!

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