近红外荧光染料diSulfo Cyanine7 azide(Ethyl),二磺酸-Cy7-叠氮(乙基),的荧光标记原理包括哪些内容?
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2026-08-27 10:40:44
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【diSulfo-Cy7 N3(Ethyl)技术参数】

- 中文名称:二磺酸-Cy7-叠氮(乙基),水溶-Cyanine7-叠氮(乙基)

- 英文名称:diSulfo-Cy7 azide(Ethyl),diSulfo-Cyanine7 azide(Ethyl),diSulfo-Cy7 N3(Ethyl),diSulfo-Cyanine7 N3(Ethyl)

- 分子式:C38H47ClK2N6O7S2

- 分子量:877.6

- 供应商:陕西新研博美生物科技

-结构式:

[图片]

-存放条件:干燥、黑暗,短期(几天到几周)在0-4摄氏度,长期(几个月到几年)在-20摄氏度

-溶解性: 溶于二氯甲烷、极性有机溶剂(DMF、DMSO)、醇类、低水

-备注条件: 避免频繁的溶解和冻干,取用时注意干燥

【diSulfo-Cy7 azide(Ethyl)的荧光标记原理】

diSulfo-Cy7 azide(Ethyl)(二磺酸-Cy7-叠氮(乙基))的荧光标记原理可以从荧光发光机制和化学偶联机制两个层面来理解:

一、分子结构组成

该分子由三个功能模块构成:

1.Cy7花菁荧光团:核心发光单元,属于花菁(Cyanine)类近红外染料,具有较长的共轭多甲川链结构,使其能在近红外区产生荧光发射。

2.双磺酸基团(-SO₃⁻):赋予分子优异的水溶性,同时携带的负电荷可减少与生物分子的非特异性吸附,降低背景信号。

3.叠氮基团(-N₃):作为生物正交反应的"化学手柄",用于与炔基分子进行特异性共价连接。

二、荧光发光原理

Cy7荧光团的发光基于共轭π电子体系的激发-辐射跃迁:

1.激发:当Cy7分子吸收近红外光(激发波长约 750 nm)后,共轭多甲川链上的π电子从基态(S₀)跃迁至激发态(S₁)。

2.辐射跃迁:激发态电子经振动弛豫后回到基态,以光子形式释放能量,发射出波长更长的近红外荧光(发射波长约 773 nm)。

三、标记流程总结

整个荧光标记过程可概括为:

1.目标分子预处理:将炔基(或DBCO等环炔)通过代谢标记、化学修饰等方式引入目标生物分子(蛋白质、核酸、糖类等)。

2.点击偶联:将 diSulfo-Cy7 azide(Ethyl) 与炔基修饰的目标分子混合,在适当条件下发生点击反应,形成稳定的三唑环共价键。

3.荧光检测:偶联完成后,Cy7荧光团随目标分子定位,在近红外光激发下发射 773 nm 荧光信号,实现可视化追踪。

【diSulfo-Cy7 azide(Ethyl)实验类型】

diSulfo-Cy7 azide(Ethyl) 作为一种水溶性近红外荧光染料,其叠氮反应基团和Cy7荧光核心使其适用于多种实验类型,主要涵盖以下几大类:

一、点击化学偶联实验

这是该试剂核心的实验类型,利用末端叠氮基团(-N₃)与炔基分子发生特异性共价连接:

1.铜催化叠氮-炔环加成(CuAAC):在CuSO₄/抗坏血酸钠体系下,与含末端炔基的分子反应,形成稳定的1,2,3-三唑环。

2.无铜点击反应(SPAAC):与DBCO、BCN等环张力炔烃直接反应,无需金属催化剂,适用于对金属离子敏感的生物体系。

二、生物分子荧光标记实验

通过点击化学将Cy7荧光团共价连接到各类生物分子上,实现近红外荧光标记:

1.蛋白质/多肽标记:将炔基修饰的蛋白质或多肽与diSulfo-Cy7 azide偶联,用于荧光示踪和功能研究。

2.核酸标记:标记经代谢标记或化学修饰引入炔基的DNA/RNA,用于核酸检测和分子诊断。

3.糖类示踪:与炔基修饰的糖类分子偶联,用于糖生物学研究中的糖类示踪与分析。

三、近红外荧光成像实验

Cy7荧光团在近红外区具有优异的光学特性(激发~750 nm,发射~773 nm),适用于多种成像场景:

1.细胞荧光成像:通过荧光显微镜检测标记后的细胞,观察目标分子的亚细胞定位和分布。

2.活体近红外荧光成像(NIRF):利用近红外光组织穿透深、自发荧光干扰低的优势,进行小动物体内荧光成像,追踪标记分子的组织分布。

3.离体组织成像:对取出的器官或组织切片进行荧光检测,验证体内实验结果。

四、多色荧光成像实验

由于Cy7的发射波长(~773 nm)位于近红外区,与其他可见光荧光染料(如FITC、Cy3、Cy5等)光谱不重叠,可用于:

1.多色标记:与其他荧光染料组合,实现同一体系中多种目标分子的同步标记和区分检测。

2.流式细胞术:作为近红外通道荧光标记物,用于高参数流式分析和细胞分选,减少生物样本自发荧光的干扰。

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